ELISA作為免疫學中最經典的實驗，能及時和經濟地測定和量化樣品中的抗原或抗體，被視為生物樣品定量檢測的金標準。為了獲取最準確的實驗結果，應盡可能消除其他類因素帶來的誤差和影響，因此需要參照各類不同樣本的處理和保存辦法進行實驗前準備 。卓渝生物為大家準備了一份ELISA樣本收集/保存/運輸指南，助力您的科研實驗更加精準、高效！

ELISA進行檢驗常見的樣本一般包括血清、血漿、尿液、糞便、細胞、動物組織、植物組織、胸腹水、腦脊液、肺泡灌洗液等，這些樣本的收集、處理的方法和保存都有一定的要求，如果處理不當，會直接影響到之后的正式試驗。

1、血清

干燥管（黃色）或促凝管（紅色）收集全血，室溫自然凝固10-20min，離心5-10min（2500-3500rpm）。采血過程中應避免溶血，仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心；

2.血漿

抗凝管（紫色、黑色、綠色）收集全血，采集后馬上混勻，靜置10min左右，離心5-10min（2500-3500rpm）。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心；

3.尿液

用無菌管收集，離心10-20min（2500-3500rpm），仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心；

4.糞便

用無菌 15ml 離心管收集, 1g 樣本+9ml PBS（0.01M，pH=7.4），充分勻漿完離心5-10min（2500-3500rpm/min），取上清備用；

5. 細胞

檢 測 分 泌 性 的 成 份 ： 用 無 菌 管 收 集 ， 5-10min（2500-3500rpm），仔細收集上清；

細胞內指標：吸去培養板內的培養基，胰酶消化細胞，收集細胞沉淀，PBS（0.01M，PH=7.4）清洗一次，PBS 稀釋細胞懸液，細胞濃度達到 1×106個/ml 左右，充分研磨后超聲裂解（用超聲細胞破碎儀，300W功率，每次超聲3～5秒，間隔30秒，重復4～5次），或反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份，離心5-10min（2500-3500rpm），取上清備用；

6.動物組織

用無菌 15ml 離心管收集, 組織重量不能低于 50mg，1g 組織加入 9ml PBS（0.01M，PH=7.4），手工或勻漿器將標本勻漿充分，勻漿過程中，PBS 分 2 次加進去，這樣勻漿更充分。充分勻漿完離心 5-10min（2500-3500rpm/min）。取上清備用（切勿加入細胞裂解液）；

7.植物組織

用無菌15ml離心管收集, 組織重量不能低于 50mg，1g 組織加入 9ml PBS（0.01M，PH=7.4），手工或勻漿器將標本勻漿充分，勻漿過程中，PBS 分 2 次加進去，這樣勻漿更充分。充分勻漿完離心 5-10min（2500-3500rpm）。取上清備用（切勿加入細胞裂解液）；

8.牛奶

8000rpm 高速離心，離心后分三層，第一層是脂肪層，中間層是乳清，底層是固態蛋白，取中間層保存備用 。乳清量參照血清量；

9.胸腹水、腦脊液、肺泡灌洗液

處理方法同尿液。

注意事項

1. 不能檢測含NaN?的樣品，因NaN? 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性；

2. 收集血液應避免產生溶血現象。紅細胞破碎，釋放大量的過氧化物酶，會影響ELISA檢測中的辣根過氧化物酶（HRP）或堿性磷酸酶（AP）的酶促反應，造成檢測結果的不確定性；

3. 在檢測前，冷凍過的樣本應緩慢地融化并離心除去凍融過程產生的沉淀物，室溫混勻后使用；

4. 若使用化學裂解液制備組織勻漿或細胞提取液，由于引入某些化學物質會導致ELISA測值出現偏差；

5. 對于組織勻漿、組織全蛋白、細胞提取液等蛋白提取樣本，經BCA法測定樣本蛋白含量后，建議進行蛋白濃度的統一化，避免因組織重量、細胞數、產物體積等因素造成的人為誤差。

樣本的保存與運輸

保存

樣品收集后若在1周內進行檢測可保存于2-8℃，若不能及時檢測，請按一次使用量分裝，凍存于-20℃或-80℃，避免反復凍融。

運輸

使用冰袋或干冰運輸，確保運輸到達里面的冰袋或干冰未融化，運輸時間應盡量短。